摘 要：建立气相谱法测定桂枝茯苓胶囊中丹皮酚的含量。方法：以正十五烷为内标物，HP-1甲基硅氧烷弹性石英毛细管柱（30m×0.25mm，0.25μm），柱温：120℃，载气流速：每分钟2.5mL；分流进样，分流比为20∶1，进样量2μL；定量方法：内标峰面积法。丹皮酚在0.05～3.2mg·mL-1范围内呈良好的线性关系（r=0.99996）。丹皮酚平均回收率分别为99.1%。结论：本法简便、准确，可用于丹皮酚的含量测定。
关键词：桂枝茯苓胶囊；含量；测定
桂枝茯苓胶囊具有活血、化瘀、消癥等功效。桂枝茯苓胶囊主要用于女性乳腺囊性增生病属瘀血阻络证，症见乳房疼痛、乳房肿块、胸胁胀闷；妇人瘀血阻络所致癥块、经闭、痛经、产后恶露不尽；前列腺增生属瘀阻膀胱证，症见小便不爽、尿细如线、或点滴而下、小腹胀痛者等。现代药理研究表明桂枝茯苓胶囊具有调节血流变、抗炎、子宫平滑肌的双向调节作用、调节免疫、抗肿瘤等作用。牡丹皮具有清热，凉血，和血，消瘀等功效。《日华子本草》记载：
"除邪气，悦，通关腠血脉，排脓，通月经，消扑损瘀血，续筋骨，除风痹，落胎下胞，产后一切冷热血气。"牡丹皮具有保肝护肾、降血糖、抗菌消炎、保护心血管、神经保护、抗心律失常、抗过敏、增强免疫力等多种药理作用[1-2]。丹皮酚具有镇静、催眠、抗菌、抗炎、抗氧化、降血压等作用。本文采用气相谱法对桂枝茯苓胶囊中的丹皮酚进行了含量测定。
1 仪器与试药
1.1 仪器：GC-4100系列气相谱仪（北京东西分析仪器有限公司）；AE 224 触摸式彩屏电子分析天平（上海舜宇恒平科学仪器有限公司）；GA-2000A低噪音空气泵（GA-2000A低噪音空气泵）；氮气发生器（苏州艾唯尔气体设备有限公司）；北分三谱DK-6900A型自动顶空进样器（北京北分三谱仪器有限责任公司）；GCH-300型氢气发生器（北京北分华谱分析仪器技术有限公司）；Medium-S超纯水机（标准版）（上海和泰仪器有限公司）；AP-01P无油隔膜真空泵（杭州格图科技有限公司）；H.S11-1电热恒温水浴锅（上海昨非实验室设备有限公司）；R-210瑞士BUCHI旋转蒸发仪（广州尚准仪器有限公司） ；LM-C300超声波清洗器（武汉朗玛瑞特仪器有限公司）。
1.2 谱柱：HP-1甲基硅氧烷弹性石英毛细管柱（30m×0.25mm，0.25μm）。
1.3 对照品：丹皮酚对照品（中国药品生物制品检定所）。
1.4 试剂：水为纯化水，（上海安谱科学仪器有限公司）、正十五烷（上海安谱科学仪器有限公司）。
1.5 试药：桂枝茯苓胶囊。
2 测定方法确定
2.1 谱条件
以正十五烷为内标物，HP-1甲基硅氧烷弹性石英毛细管柱（30m×0.25mm，0.25μm），柱温：120℃，载气流速：每分钟2.5mL；分流进样，分流比为20∶1；定量方法：内标峰面积法，进样量： 2μL。
2.2 对照品的制备
2.2.1 内标溶液的配制
取正十五烷，加溶解并定容至刻度，摇匀，制成0.3mg·mL-1的溶液。
2.2.2 对照品溶液的制备
精密称取丹皮酚对照品2.0mg至于10毫升棕容量瓶中，精密加入内标溶液5mL，震荡溶解，加定容，摇匀。
2.3 供试品溶液的制备
精密称取桂枝茯苓胶囊，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率300W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液40ml，水浴蒸干续滤液，用溶解并转移至5毫升容量内，用定容，摇匀，取2毫升至5毫升容量瓶内，加2毫升内标溶液，加定容，摇匀，即得。
2.4 专属性试验
依照处方取桂枝、茯苓、桃仁、白芍，按样品制备工艺制成阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在丹皮酚出峰处阴性液无谱峰，表明本方法专属性良好。
2.5 对照品的线性考察
按对照品溶液的制备方法分别配制0.05mg·mL-1、0.1mg·mL-1、0.2mg·mL-1、0.4mg·mL-1、0.8mg·mL-1、1.6mg·mL-1、3.2mg·mL-1的对照品溶液。取上述溶液，分别精密上述溶液吸取1μL，注人气相谱仪，依照2.1项下的谱条件测定，记录谱峰。以丹皮酚与内标峰面积比值（Y）为纵坐标，浓度（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，丹皮酚在0.05～3.2mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.6 重现性试验
称取同一批的丹皮酚样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.88%，结果表明此方法的重现性良好。
2.7 准确度试验
取对照品适量，加入到样品中，加入量分别相当于样品含量的 80%、100%、120%。取模拟片照“含量测定”项下方法试验，计算回收率为 99.1%，RSD为0.93%。
2.8 样品稳定性试验
取同一批丹皮酚样品，按2.3项下的供试品制备方法制备供试品，将供试品置棕容量瓶室温下放置，分别于0、1、2、4h进样4次，计算丹皮酚峰面积与内标峰面积之比的RSD为0.9% （n=4）。结果表明溶液在4h内稳定性良好。
2.9 样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定丹皮酚三批样品中丹皮酚的含量，结果三批样品的含量分别为2.02、2.05、2.13mg·片-1。
3 讨论
丹皮酚为白或微黄有光泽的针状结晶，易溶于乙醇和甲醇中，溶于乙醚、丙酮、苯、氯仿及二硫化碳中，不溶于冷水，能随水蒸汽挥发。目前研究丹皮酚测定方法的报道较多，如光度分析法、高效液相谱法等，各种方法各有特点[3-5]。本实验表明此方法分离效果好、方法简便、快捷、准确，、专属性好，可用于桂枝茯苓胶囊中丹皮酚的含量测定。
参考文献
[1]丹皮总甙和白芍总甙的细胞保护作用、自由基清除作用及肝保护作用的比较研究[J].高本波，徐叔云，戴俐明.安徽医科大学学报.1991（03）
[2]牡丹皮的化学成分、药理作用及临床应用研究概况[J].张健萍，李连珍，赵红江，王宪玲.中华中医药杂志.2006（05）
[3]不同炮制方法对牡丹皮中丹皮酚、芍药苷、总黄酮及总多糖含量的影响[J].熊艳，张杰，时军，黄嗣航.中国实验方剂学杂志.2014（23）
[4]气相谱法同时测定三川丹皮酚膏中4种成分含量[J].孔松芝，易宇阳，石书江，黄思涵，冯学轩，苏子仁.中国中医药信息杂志.2012（06）
[5]房杏春，殷霞，相秉仁.直接蒸发高分辨气相谱分析牡丹皮和六味地黄丸中丹皮酚的含量[J].中国药科大学学报，1989，20buchi（6）：370.
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