蛋白质含量测定法（吸收系数法）方法开发报告
类别
技术标准文件
文件编号
XXXXX
版本号
V00
页码
共  页
生效日期
    年  月  日（禁止复印）
审批页
—
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审核人
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部门
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年  月  日
buchi年  月  日
年  月  日
颁发部门：质量保证部
分发部门：存档
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V00
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新起草


1目的
对XX蛋白质含量测定方法（紫外吸收法）的消光系数进行研究，以期获得最适的消光系数，从而确保该方法科学、合理，检测结果准确并稳定可靠。
2范围
适用于XX蛋白质含量测定方法（紫外吸收法）的方法开发。
3定义
名称（缩略词）
释义
XX
Lowry法
福林酚法
Bradford法
考马斯亮蓝法
BSA
牛血清白蛋白
4环境、健康和安全
在本报告的开发过程中，会使用到强酸（如硫酸）、强碱（如氢氧化钠）及其它腐蚀性液体（如福林酚试剂），实验操作过程中应佩戴好手套与口罩，避免造成皮肤损伤；酸性、碱性废液应分别用碱、酸中和后再倾倒；腐蚀性液体切勿倒入下水道，应倒入废液桶，由专业部门回收。在凯氏定氮实验过程中，会使用到高温设备（消化炉），实验操作过程中应佩戴好隔热防护手套，避免烫伤。
5培训
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6职责
6.1质量保证部：负责审核本方法开发报告。
6.2质量研究部：负责起草本方法开发报告。
7程序（内容）
7.1概述
紫外吸收法测定蛋白质含量具有方法快速、方法稳定、结果准确的优点，其基本原理是依据蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、氨酸等芳香族氨基酸，其在280nm波长处具有最大吸光度，在一定范围内其吸光度大小与蛋白质浓度呈正比。通过光谱扫描（扫描范围为400nm~240nm）可获得供试品的最大吸收峰波长及在最大吸收峰波长处的吸光度值，再根据供试品在最大吸收峰处的特定消光系数及样品稀释倍数，通过朗伯比尔定律可计算出供试品的蛋白质含量。
在紫外吸收法测定XX蛋白质含量实验中，关键实验参数为消光系数，所以在整个开发过程中对消光系数进行了摸索研究。分别采用Edelhoch法、凯氏定氮法、Lowry法、凯氏定氮法、Bradford法对XX原液进行检测，最终确定以Bradford法对样品进行蛋白质定量，通过光谱扫描结果推导出样品在最大吸收峰（280nm）处的消光系数为XX[ml/(mg.cm)]。
7.2实验材料
7.2.1研究样品
名称
来源
批号
浓度
成分
XX原液
自制
X
X
X
X
外购
X
X
X
X
外购
X
X
X
X
外购
X
X
X
7.2.2标准物质