2.2　提取溶剂的选择
本实验尝试选择甲醇、乙腈、三3种沉淀剂对王浆基质进行沉淀蛋白质，以便提取目标化合物，使用固相萃取柱进行净化。
buchi实验结果表明，蜂王浆中直接加入三作为提取剂蛋白质沉淀时，地塞米松、氢化可的松和氟米松回收率低，约有50%左右，而曲安奈德回收率只有30%左右。故弃用三作为沉淀剂；甲醇和乙腈沉淀蛋白效果并无明显差异，各化合物的回收率也差别不大，以上。由于净化使用HLB小柱，从上柱的角度考虑，选用甲醇作为蛋白质沉淀剂，可以节省浓缩步骤直接上柱。故最终选择甲醇作为提取剂，沉淀蛋白。
2.3　固相萃取小柱和淋洗条件选择
本实验尝试选择MCX、HLB、C18 3种常用的不同类型的固相萃取柱进行净化效果和保留效果的考察。C18固相萃取柱曲安西龙回收率极低，只有
除了曲安奈德回收率约为80%左右，其余回收均在60%～70%。MCX固相萃取柱和HLB固相萃取柱回收率都比较理想，相差不大。MCX固相萃取柱
皮质激素回收率在85%～100%，HLB固相萃取柱回收率在90%～100%，略微好于MCX固相萃取柱。由
于MCX固相萃取柱上柱收集所需试剂较HLB
取柱复杂，最终使用HLB固相萃取小柱净化样品。
实验采用HLB固相萃取柱进行淋洗实验，探究最佳淋洗比例。实验结果显示，使用甲醇：水＝
时有除了地塞米松、氟米松和曲安奈德3种化合物，其余4种都不同程度地被洗脱下来。鉴于在淋洗时能确保各目标分析物不被洗脱，且水相所占溶液比例越大，对糖类等易溶于水的杂质能尽可能去除，因此淋
图１　７种糖皮质激素的ＭＲＭ图谱图
取之有度，用之有节，则常足