何祯1，何明2，代向阳2，董琼
*
（1．西南林业大学林学院，西南山地森林资源保育与利用省部共建教育部重点实验室，云南昆明
650224；2．浙江农林大学林业与生物技术学院，浙江临安311300）
摘要［目的］测定不同产地树头菜中总黄酮含量，为树头菜的优树筛选及推广提供技术支撑。［方法］以芦丁为对照品，采用亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠显法，在510nm 处利用紫外分光光度法测定西双版纳，普洱，石屏，建水4个不同产地树头菜中总黄酮的含量。［结果］西双版纳，普洱，石屏，建水4个不同产地树头菜中总黄酮的含量分别为1．89、2．22、2．02和1．49mg /g ，其中普洱树头菜中总黄酮含量最高，建水含量最低。［结论］该方法准确、可靠、重复性好，可以用作树头菜中总黄酮含量的测定。关键词树头菜（Crateva unilocularis ）；总黄酮；紫外分光光度法；不同产地中图分类号S567文献标识码A 文章编号0517－6611（2011）22－13398－02Determination of the Content of Total Flavonoids in Crateva unilocularis from Different Producing Areas HE Zhen et al （Key Laboratory for Forest Resources Conservation and Use in the Southwest Mountains of China ，Ministry of Education ，Colleg
e of Forestry ，Southwest Forestry University ，Kunming ，Yunnan 650224）Abstract ［Objective ］To determine the content of total flavonoids in Crateva unilocularis from different producing areas．［Method ］Using rutin as reference substance ，contents of total flavonoids in Crateva unilocularis from different producing areas including Xishuangbanna ，Puer ，Shiping
and Jianshui were determined at 510nm by UV spectrophotometry colored with sodium nitrite －aluminum nitrate －sodium hydroxide．［
Result ］Contents of total flavonoids in Crateva unilocularis from Xishuangbanna ，Puer ，Shiping and Jianshui were respectively 1．89，2．22，2．02and 1．49mg /g ，among which content of total flavonoids in Crateva unilocularis was the highest in Puer and lowest in Jianshui．［Conclusion ］The method was accurate ，reliable ，repeatable and could be used to determine the content of total flavonoids in Crateva unilocularis．Key words Crateva unilocularis ；Total flavonoids ；UV spectrophotometry ；Different producing areas
基金项目
西南林业大学重点基金项目（200906Z ）。
作者简介
何祯（1982－），男，山东肥城人，在读硕士研究生，研究方
向：人工林定向培育，
E-mail ：hezhen0901@163．com 。*通讯作者，副教授，博士，硕士生导师，从事困难地段植被恢
复、木本蔬菜定向培育研究，
E-mail ：bruce_100@163．com 。收稿日期2011-04-20树头菜（Crateva unilocularis ）为山柑科（Capparaceae ）鱼木属（Crateva ）的一种乔木，多为野生，高5 15m 或更高，树皮灰褐，掌状复叶有3片小叶，常生于平地或海拔1500m 以下的湿润地区
［1］
。树头菜在民间利用历史悠久，云南石
屏、建水等地的人民取其嫩叶盐渍食用，是一种口味独特、营养价值丰富的野生蔬菜。树头菜嫩茎叶富含多种营养物质，其粗蛋白、总氨基酸、人体必需氨基酸的含量均高于普通蔬菜的平均值，尤其是P 、K 、Ca 、Mg 、Fe 的含量是普通蔬菜的数倍
［2］
。此外，树头菜还含有丰富的胡萝卜素、硫胺素和维生
素C ［3］
。除食用外，树头菜兼具药用价值。根具有清热解
毒，
舒筋活络之功效，可用于肝炎、痢疾、腹泻等疾病。叶具有健胃之效，可解毒，治烂疮
［3］
buchi。树头菜驯化栽培粗生
速长，病虫害较少，是很有发展利用前景的野生蔬菜［4］
。该
树种分布虽较为广泛，
但主要为野生，少人工栽培。不同地域由于自身遗传因素和温度、土壤等环境因素的影响使树头菜中营养成分差异较大，为了能充分发挥该树种价值，筛选营养价值较高的树头菜新品种，
急需对树头菜进行各种营养成分含量分析研究。生物总黄酮是指黄酮类化合物，是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。笔者利用紫外分光光度法对采自建水、石屏、普洱和西双版纳四个地区树头菜嫩叶中黄酮含量进行比较分析，为树头菜的优树筛选及推广提供技术支撑。1材料与方法1．1材料
1．1．1
研究对象。树头菜嫩叶，分别产自建水、石屏、普洱
和西双版纳4个地区。
1．1．2主要试剂。芦丁对照品为生化试剂；其余试剂均为市售分析纯。
1．1．3
主要仪器。UV-1000紫外分光光度仪，由北京莱伯泰
科仪器有限公司生产；超声波清洗器，
由瑞士BUCHI 有限公司生产；旋转蒸发仪，由上海爱郎仪器有限公司生产。1．2方法
1．2．1
标准曲线的绘制。精密称取芦丁标准品20．0mg ，置
于100ml 容量瓶中，加70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得标准品溶液。精密量取0．0、
0．5、1．0、1．5、2．0、2．5ml 标准品溶液，置于10ml 容量瓶中，加70%甲醇至5ml ，加入0．3ml 5%亚硝酸钠溶液放置6min ，再加0．3ml 10%硝酸铝溶液，放置6min ，再加4ml 1mol /L 氢氧化钠溶液，加70%甲醇至刻度，摇匀，放置30min ，以0．0ml 为空白对照，在510nm 处测定吸光度［5］，以标准品溶液浓度对照吸光度作图。1．2．2
供试品溶液的制备。精密称取10．0g 树头菜鲜叶，
剪成小段，50ml 70%甲醇溶液超声提取2次，每次1h ，过滤，滤渣洗涤，旋转蒸发仪浓缩至干，甲醇溶解，过滤除去析出物，定容至100ml 容量瓶中，即得供试品溶液。1．2．3
精密度试验。精密吸取供试样品溶液1．5ml ，置于
10ml 容量瓶中，按照“1．2．1”测定吸光度值，连续测定6次，计算RSD 值。1．2．4
重复性试验。精密称取5份同一产地树头菜，每份
10．0g ，按照“1．2．2”制备供试品溶液，精密吸取1．5ml ，按照“1．2．1”测定吸光度值，计算RSD 值。1．2．5
加样回收率试验。精密称取5份同一产地树头菜，
每份10．0g ，分别加入不同量的芦丁标准品，按照“1．2．2”制备供试品溶液，精密吸取1．5ml ，按照“1．2．1”测定吸光度值，计算平均回收率及RSD 值。1．2．6
不同产地树头菜中总黄酮含量测定。精密称取10．0
g 不同产地树头菜样品，按照“1．2．2”制备供试品溶液，分别移取3份1．5ml 至3个10ml 容量瓶中，
按照“1．2．1”测定吸责任编辑侯美灵责任校对况玲玲
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri．Sci．2011，39（22）：13398－13399
光度值，计算总黄酮含量。
2结果与分析
2．1线性关系考察图1为芦丁的标准曲线，计算得回归方程为A=11．717C－0．0068，R2=0．9992，
表明在0．01 0．05mg/ml范围内线性关系良好。
2．2精密度试验总黄酮的RSD值为0．21%，表明试验精密度良好。
2．3重复性试验总黄酮的RSD值为1．10%，表明该方法重复性良好。
2．4加样回收率试验由表1可知，平均回收率为99．09%，RSD值为1．95%
。
图1芦丁标准曲线
Fig．1Standard curve of rutin
表1加样回收率试验结果
Table1Experimental results of recovery test
编号No．样品黄酮含量
Content of
sample∥mg
加入标准品量
Addition of standard
substance∥mg
测得的含量
Measured
content∥mg
加样回收率
Recovery
%
平均回收率
Average
recovery∥%
RSD
%
11．49150．21．6927100．60
21．49150．31．782496．97 31．49150．41．884598．5099．091．95 41．49150．51．981798．04
51．49150．62．0013101．60
2．5样品测定结果样品总黄酮含量测定结果见表2。由
表2可知，西双版纳，普洱，石屏，建水4个不同产地树头菜
中总黄酮含量分别为1．89、2．22、2．02、1．49mg/g。
表2样品总黄酮含量测定结果
Table2Content determination of total flavonoids in samples
样品产地Producing area 吸光度值
Absorbance
吸光度平均值珋x
Average
absorbance
浓度
Concentration
mg/ml
含量
Content
mg/g
西双版纳0．44480．43480．037691．89 Xishuangbanna0．4296
0．4301
普洱Puer0．50890．51340．044402．22
0．5185
0．5127
石屏Shiping0．46340．46640．043092．02
0．4715
0．4643
建水Jianshui0．34310．34270．029831．49
0．3440
0．3409
3结论
以芦丁为对照品，以亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠为显剂，用紫外分光光度法测定不同产地树头菜嫩叶中总黄酮含量，测得的结果为普洱（2．22mg/g）＞石屏（2．02mg/g）＞西双版纳（1．89mg/g）＞建水（1．49mg/g）。由此可知，生长于普洱的树头菜嫩叶中总黄酮含量明显高于其他三个地区树头菜嫩叶中总黄酮含量。黄酮类化合物由于具有广谱的药理作用而引人瞩目，对人体内的自由基有明显的清除作用，并可抑制细胞的凋亡，是心血管疾病药物的主要成分［6］。在药用价值上，普洱地区树头菜更具有推广的价值。植物中的黄酮类化合物结构上含有酚羟基和还原性羟基，能与金属盐试剂形
成有络合物，分光光度法就是利用这个原理进行测定，此方法受花素，酚酸等成分的干扰，结果存在一定的误差。黄酮类化合物的测定方法还有高效液相谱法，毛细管点用法和薄层扫描法等，其中分光光度法测定总黄酮含量具有快速，简便的特点。
参考文献
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99331
39卷22期何祯等不同产地树头菜中总黄酮含量的测定
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