摘要 主要介绍了利用H2SO4-H2O2消煮法、半微量蒸馏法检测植物全氮时的注意事项，以为准确测定植物全氮提供参考。
关键词 植物全氮；测定；半微量蒸馏法；注意事项
氮关系到植物生长、产量形成与品质改善。因此，掌握作物全氮含量，在生产和科研上有重要的意义。一般植物含氮占干物重的0.3%~5.0%，氮素主要以有机氮（如蛋白质和氨基酸等）形态存在于植物组织中。该试验用H2SO4-H2O2消煮法、半微量蒸馏法检测植物全氮的含量。植物组织中的含氮有机化合物，在浓H2SO4溶液中分解出新生态铵，H2O2具有强烈的氧化作用，分解H2SO4所没有破坏的有机酸和碳，变成CO2和水，使有机氮转化成铵盐，然后加碱蒸，用硼酸溶液吸收氨，用标准酸滴定，可同时适用N、P、K的测定。试验过程中要提高测定准确性，需注意以下几点。
（1）选用质量合格的仪器、药品、试剂、纯水。一是在实验开始前1周对仪器进行清洗、调试、校准，确保仪器正常使用，测定中用的吸管、消化管、三角瓶、容量瓶要冲洗干净；二是
购买的药品要纯度高、质量好，特别是H2O2应不含氮和磷，其质量影响消煮快慢，为保证实验效果，一般采用上海生产的医用H2O2，H2O2在光照和加热的条件下易分解，应存于阴凉干燥处。同时，酸性条件也能阻止H2O2分解，故保存时可加入适量H2SO4；三是试剂的配制要精确，配制的2% H3BO3指示剂溶液pH值要调解至4.5（紫红），用酸度计测量时一定要确保测量结果准确。指示剂混合液配置好后应尽快使用，使用中若pH值发生变化，要立即用稀酸或碱调节；四是纯水机不使用时应关掉电源、水源，再将机内储存的纯水全部排放。纯水机在每次使用后，要冲洗5 min。另外，在连续使用一段时间后，应将机内的纯水全部排放1次，以清洗纯水机；五是试验中一般用聚已烯或玻璃容器盛装纯水，容器使用前用20%盐酸溶液浸泡2~3 d，再用待储存的水反复冲洗，然后注满，浸泡6 h以上方可使用[1-2]。
（2）试验人员每次称取药品、土样要精准，吸取试剂时凹面要与吸管的刻度相切，同时，努力学习专业技术知识，提高化验能力，尽量减少人为误差对结果的影响。
（2）因试样烘干过程中可能使全氮量发生变化，所以测量全氮含量应用风干样品测定。buchi
（3）使用万分之一分析天平称取样品，精确到0.000 1 g，使用前用200 g砝码进行校准。称
样量决定于N、P、K含量，健壮茎叶称0.5 g，种子称0.3 g，老熟茎叶称1 g，新鲜茎叶样按干样的5倍称样。称样量大时，适当增加浓H2SO4用量。
（4）加入浓H2SO4的植物样品一定要放置过夜，使消煮管中待测样品被酸液浸透部分碳化后，再进行消煮。
（5）在消煮时，小火加热至浓H2SO4发白烟，再继续升温，直至溶液呈均匀的棕黑时取下。稍冷后加10滴H2O2，并不断摇动消化管，再放到消煮炉上继续加热。此时可将炉温调到380 ℃，在微沸状态下，消煮7~10 min取下，稍冷后重复加H2O2，每次添加量逐渐减少，一般籽粒重复4次，秸秆重复5~6次即可澄清。加H2O2应直接滴入瓶底液中，如滴在瓶颈内壁上，H2O2会很快分解，将不起氧化作用，若遗留下来会影响磷的显。消煮的温度应控制在380~390 ℃，此时消煮的溶液保持微沸，硫酸蒸汽在消化管上部1/3处冷凝流回。超过400 ℃溶液将剧烈沸腾，硫酸蒸汽达到消化管顶部甚至溢出，引起硫酸铵热分解而导致氮素损失。
（6）消煮过程中，为避免H2O2残留对比测定的影响，在溶液呈无或清亮后，继续加热10 min。冷却后，用少量水冲洗小漏斗于消化容量管中，将消煮液转移到100 mL容量瓶中，
并用纯水冲洗2次消化管，然后定容，摇匀。每批消煮的同时进行空白试验，以校正试剂和方法的误差。
（7）蒸馏时，对清洗过的蒸馏装置检查是否漏气和管道是否洁净，然后吸取定容后的消煮液10 mL注入半微量蒸馏器的内室。在150 mL三角瓶中加入5 mL 2% H3BO3指示剂溶液，放在冷凝管下端，管口置于H3BO3液面以上3～4 cm处，然后向蒸馏器内慢慢加入NaOH溶液，通入蒸汽蒸馏。待馏出物体积50~60 mL时，停止蒸馏，用少量已调节至pH值为4.5的水冲洗冷凝管末端。开放冷凝水时，勿使馏出液温度超过40 ℃，一般籽粒蒸馏2 h，秸秆蒸馏2.5~3.0 h，但由于仪器型号及蒸馏电流设置不同，应首先作试验确定，即用纳氏试剂逐分钟检查蒸馏液中是否含有铵。
（8）在用酸标准溶液滴定时，馏出液由蓝绿突变为紫红，终点的颜应和空白测定的滴定终点颜相同。与此同时，进行空白测定的蒸馏、滴定，以校正试剂和滴定误差。
（9）如果样品含氮量高，可将消煮液定容，取一部分进行定容，计算结果按所取溶液的分取倍数计算[3-4]。
（10）每批样品测定时，要做空白试验、平行试验，并带1个参比样，以检测滴定结果的准确性，不准确的重新称样。
（11）试验人员要认真填写原始记录，字迹工整，记录齐全，更改规范并注意保存，要做好样品的称取、转移、定容，并且每一项操作都要认真核对，避免人为出错。
参考文献
[1] 刘淑梅，张来振.半微量蒸馏法测定复混肥中的总氮[J].化学分析计量，2009（1）：81-82.
[2] 周德庆，马敬军，徐晶晶.半微量蒸馏法测定水产品中挥发性盐基氮不确定度的研究[J].中国食品学报，2003（z1）：206-210.
[3] 周敏，李欣红.开氏消煮—常量蒸馏—纳氏试剂光度法测定土壤中的全氮量[J].现代科学仪器，2004（1）：26-27.
[4] 黄瑾，章厉劼.BuchiK-370全自动凯氏定氮仪与半微量蒸馏法测定饲料中粗蛋白的比较[J].饲料与畜牧：新饲料，2007（7）：32-34.
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