刘莉; 李婷婷; 王欣; 孔卫东
【期刊名称】《《中国药业》》
【年(卷),期】2019(028)019
【总页数】3页(P43-45)
【关键词】安神补心片; 五味子; 首乌藤; 女贞子; 石菖蒲; 菟丝子; 薄层谱鉴别
【作 者】刘莉; 李婷婷; 王欣; 孔卫东
【作者单位】四川省成都市食品药品检验研究院 四川成都 610045
【正文语种】中 文
【中图分类】R932; R284.1; R286.0
buchi
安神补心片处方来源于国家标准［1］，由丹参、石菖蒲、五味子（蒸）、首乌藤、墨旱莲、合欢皮、菟丝子、女贞子、地黄、珍珠母10味中药组方，临床用于阴血不足、虚火内扰所致的心悸失眠，头晕耳鸣。安神补心片现有的质量标准较低，特别是薄层谱鉴别仅涉及五味子、首乌藤、女贞子，且女贞子鉴别项中使用齐墩果酸作为指标成分，存在较大争议。本研究中以安神补心片为研究对象，对原标准中的五味子、首乌藤的薄层谱鉴别进行了完善，新增了石菖蒲、菟丝子的薄层谱鉴别，特别对其中女贞子薄层谱鉴别存在的问题进行了改进，完善了安神补心片的质量标准。现报道如下。
1 仪器与试药
1.1 仪器
4型薄层谱自动点样仪、薄层谱成像及文件系统（瑞士卡玛公司）；AEG220型电子天平（感量为0.1mg，日本岛津公司）；SK250H型超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；HH-4型数显恒温水浴锅（常州国华电器有限公司）；K-350型半自动凯氏定氮仪（瑞士Buchi公司）。
1.2 试药
石菖蒲对照药材（批号为121098-201105），菟丝子对照药材（批号为121232-201102），首乌藤对照药材（批号为120939-201507），五味子对照药材（批号为120922-201309），女贞子对照药材（批号为111926-201203），特女贞苷对照品（批号为 111926-201203，含量为96.4%），五味子甲素标准品（批号为111764-201714，含量为99.3%），大黄素甲醚（批号为110758-201616，含量为 99.0% ），β -细辛醚对照品（批号为112018-201601，含量为96.8%），均由中国食品药品检定研究院提供；安神补心片（Ⅰ，糖衣片，太极集团四川绵阳制药有限公司，批号为1806001；Ⅱ，薄膜衣片，太极集团四川绵阳制药有限公司，批号为1710004，1803001；Ⅲ，薄膜衣片，吉林百姓堂药业有限公司，批号为20161101；Ⅳ，薄膜衣片，比智高药业有限公司，批号为20170501；Ⅴ，薄膜衣片，太极集团重庆桐君阁制药厂有限公司，批号为18080001，18090001）；其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 五味子
取样品10片，除去包衣，研细，取2 g，精密称定，加20 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取五味子对照药材0.5 g，
加20 mL，同法制成对照药材溶液。再取五味子甲素对照品，加制成每1 mL含2 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层谱法（2015年版《中国药典（四部）》通则0502）试验，吸取上述溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（30～60 ℃）-甲酸乙酯 -甲酸（15∶5∶1，V/V/V）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，温度为15℃，相对湿度为50%，置紫外光灯（254 nm）下检视。供试品溶液谱中，在与对照药材溶液和对照品溶液谱相应位置上显相同颜的斑点。详见图1 A。
2.2 首乌藤
取样品10片，除去包衣，研细，加甲醇30 mL，超声处理30 min，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取首乌藤对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。再取大黄素甲醚对照品适量，制成甲醇的饱和溶液，作为对照品溶液。照薄层谱法（2015年版《中国药典（四部）》通则 0502）试验，吸取上述溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯 -甲酸（15∶5∶1，V/V/V）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，温度为15℃，相对湿度为50%，置紫外光灯（254 nm）下检视。供试品溶液谱中，在与对照药材溶液和对照品溶液谱相应位置上显相同颜的荧光主斑点。详见图1 B。
图1 五味子及首乌藤薄层谱图
2.3 石菖蒲
取样品30片，研细，置蒸馏管中，加水约30 mL，摇匀，水蒸气蒸馏，收集馏出液约50 mL置锥形瓶（预先装入水5 mL）中，蒸馏管中残渣备用，馏出液用石油醚（60～90℃）振摇，提取2次，每次50 mL，合并提取液，残渣挥至近干，残渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取石菖蒲对照药材1 g，加乙酸乙酯5 mL，超声处理15 min，滤过，滤液作为对照药材溶液。再取β-细辛醚对照品适量，加乙酸乙酯制成每1 mL含0.5 mg溶液，作为对照品溶液。参照安神补心片中除石菖蒲外，取其他9味药材组方比例和工艺制备缺石菖蒲阴性样品，按供试品溶液制备方法制得缺石菖蒲阴性对照品溶液。照薄层谱法（2015年版《中国药典（四部）》通则0502）试验，吸取上述溶液各10～20 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（4 ∶1，V/V）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以醋酸溶液，温度为15℃，相对湿度为50%，稍干后立即置紫外光灯（254 nm）下检视。供试品溶液谱中，在与对照药材溶液和对照品溶液谱相应位置上显相同颜的荧光主斑点，阴性对照无干扰。详见图2 A。
2.4 菟丝子
取石菖蒲鉴别项下残渣，离心，取上清液，用石油醚（30～60℃）50 mL，振摇提取，弃去石油醚液，水液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30 mL，水液备用，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液。另取菟丝子对照药材1 g，加水50 mL煎煮 30 min，放冷，滤过，自“滤液用石油醚（30～60℃）50 mL”起，同法制成对照药材溶液。参照安神补心片中除菟丝子外，取其他9味药材组方比例和工艺制备缺菟丝子阴性样品，按供试品溶液制备方法制得缺菟丝子阴性对照品溶液。照薄层谱法（2015年版《中国药典（四部）》通则0502）试验，吸取上述2种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-无水甲酸-水（20∶2∶3，V/V/V）为展开剂，温度为15℃，相对湿度为50%，展开，取出，晾干，喷以5%亚硝酸钠60%的乙醇溶液，置紫外光灯（254 nm）下检视。供试品溶液谱中，在与对照药材溶液谱相应位置上显相同颜的斑点，阴性对照无干扰。详见图2 B。
图2 石菖蒲、菟丝子及女贞子薄层谱图
2.5 女贞子
取菟丝子鉴别项下水液，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次50 mL，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇5 mL使溶解，作为供试品溶液。另取女贞子对照药材1 g，加水50 mL，煎煮30 min，滤过，滤液用水饱和正丁醇振摇提取2次，每次50 mL，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为对照药材溶液。再取特女贞苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。参照安神补心片中除女贞子外，其他9味药材组方比例和工艺制备缺女贞子阴性样品，按供试品溶液制备方法制得缺女贞子阴性对照品溶液。照薄层谱法（2015 年版《中国药典（四部）》通则 0502）试验，吸取上述溶液各1～5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以 -甲醇 -水（13∶7∶2，V/V/V）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显清晰，温度为15℃，相对湿度为50%，置紫外光灯（254 nm）下检视。供试品溶液谱中，在与对照药材溶液和对照品溶液谱相应位置上显相同颜的荧光主斑点，阴性对照无干扰。详见图2 C。
3 讨论
薄层谱法一直为药品质量标准控制最简单、科学且有效的检测手段，由于其操作方便，检测手段多样化，在中药材和中成药的定性分析中应用十分广泛。使用关键点在于对样品的前
处理，展开剂、显剂及薄层谱板载体的选择，故在方法学研究中需根据具体药品制剂中药材的使用情况，对方法进行适当地调整或改进，如调整薄层谱展开剂系统、显示剂的更换或选择适合的薄层谱载体使薄层鉴别更清晰，阴性对照无干扰，其谱图的重复性好［2-3］。
五味子的薄层谱鉴别为原标准已有项目，本研究中，对原标准方法进行了验证，但硅胶G板碘蒸气中显效果不佳，斑点不清晰。参照2015年版《中国药典》五味子药材项下有关内容［4-6］，将薄层板由硅胶G板更换为硅胶GF254板，显方式由碘蒸气显更换为紫外光灯（254 nm）下检视，效果较理想，并增加了五味子对照药材作为参考，能更好地鉴定安神补心片中的五味子，其谱图更加清晰、明确。
首乌藤的薄层谱鉴别为原标准已有项目，本研究结果显示，原展开剂展开斑点分离度不够好，后将展开剂修订为石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15∶5∶1，V/V//V）的上层溶液［4］265，883，［5-6］，可达到较好分离。同时考虑了大黄素甲醚为首乌藤的主要化学成分，故增加了大黄素甲醚对照品作为评定依据，可更明确地鉴别样品中首乌藤主斑点。
石菖蒲的薄层谱鉴别为新增订内容。参考2015年版《中国药典（一部）》石菖蒲药材及成
方制剂安神补心丸及安神补心颗粒项下石菖蒲的薄层谱鉴别及相关文献［4］91，882-883，［6-7］，经优化，建立了石菖蒲的薄层鉴别方法。此方法专属性强，斑点清晰，分离效果好，稳定性及重复性均良好，阴性对照无干扰，可用于安神补心片中石菖蒲的定性鉴别。
菟丝子的薄层谱鉴别为新增订内容。参考2015年版《中国药典（一部）》菟丝子药材及成方制剂安神补心丸及安神补心颗粒项下菟丝子的薄层谱鉴别及相关文献［4］883，309，［7］，经优化，制订了菟丝子的薄层鉴别方法。此方法针对性强，斑点清晰，分离效果好，稳定性及重复性均良好，阴性对照无干扰，可用于安神补心片中菟丝子的定性鉴别。
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