天津科技大学生物化学实验报告
专业:班级:
姓名学号组别第组
实验项目同组人
完成
时间
年月日
【实验名称】
【实验目的】
1、学习测定蛋白酶活力的方法。
2、学习并掌握标准曲线的绘制方法。
【实验原理】
常见酶活性酶活力测定的方法有终点法和动力学方法两类。本实验使用终点法简便易行,是很多植物酶活力测定的常用方法。
福林—酚试剂是磷钼酸盐与磷钨酸盐的混合物。它在碱性条件下不稳定,能被酪氨酸中的酚基还原,生成钼蓝、钨蓝的混合物。酪蛋白在蛋白酶作用后产生的酪氨酸可与福林—酚试剂反应,所生成的蓝化合物可用比法测定。【材料与设备】
1、仪器设备
分光光度计,恒温水浴锅,冷凝器
2、材料
市售的碱性蛋白酶制剂
3、主要试剂
(1)0.4mo/L碳酸钠
(2)4mo1/L三氯醋酸
(3)2%酪蛋白:2.0g加40mL水,另加5滴浓氨水,沸水浴溶解。
(4)福林—酚试剂
成绩:教师签字:批阅日期:
DL-酪氨酸标准曲线示意图:酶活力计算:
【注意事项】
1、注意水浴时试管内溶液易倾洒
2、比时做好空白对照
【思考题】
1、0.4mol/L碳酸钠和0.4mol/L三氯醋酸溶液的作用是什么?
2、为什么要把反应条件控制在pH值为11和温度为40℃?
化学实验报告3、稀释的酶溶液是否可以长期使用?为什么?
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